再谈二噁英——GC-MS/MS方法篇

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李丕

二噁英（Dioxin）具有很强的致癌、致畸、致突变作用。它是工业生产的副产物，随着工业排放进入生态环境。该类物质不溶于水，但可溶于脂肪，且极难通过化学和生物降解消除，因此可长时间存在于环境中，并在食物链中通过生物富集作用积累；它还具有半挥发性，能够通过远距离传播，产生“全球蒸馏效应”。国际研究显示，人体暴露于二噁英及其类似物的主要途径是进食动物源性食物，约占总暴露量的80%－95%，肉类、奶类制品和鱼类是二噁英及其类似物的主要膳食来源。

根据欧盟法规EU644/2017和EU771/2017，监测食品和饲料中二噁英的方法有2种，分别是：筛查方法和确证方法。

用来筛选二噁英含量超过MLs（最大限量）或ALs（行动水平）的样品，对可能超过MLs或ALs的样品提供“是”或“否”的判定。对于疑似不符合MLs的样品，必须通过确证方法对样品中二噁英含量进行确证。

可以准确定性和定量样品中存在的二噁英，并提供有关同类物的全部信息。除了被允许用来控制MLs和ALs；确证方法还可用于确定食品检测中的低背景水平、遵循时间趋势对人群进行暴露评估以及建立数据库，以便对ALs和MLs进行可能的重新评估。这些确证内容必须通过GC-HRMS进行。但是，为了确认符合或不符合MLs，也可以使用GC-MS/MS作为确证方法。

欧盟关于食品中二噁英最新限量标准

（EU 1259/2011）

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二噁英的检测方法有很多，但大多数参考EPA1613b方法，采用同位素稀释法GC/HRMS测定二噁英。2014年欧盟法规变更（法规EU 589/2014），首次允许使用GC-MS/MS仪器作为控制某些食品中二噁英MLs的确证方法。这项法规于2017年被EU644/2017取代，但依然允许GC-MS/MS仪器作为控制某些食品中最大含量（MLs）的确证方法。同年欧盟还颁布了EU 771/2017，允许GC-MS/MS仪器作为控制饲料中最大含量（MLs）的确证方法。

现阶段二噁英检测标准汇总（2019）

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在欧洲，采用基于性能的方法来分析二噁英。本质上，这意味着，只要所使用的方法能够满足法规要求的灵敏度及性能指标，该分析的结果就是有效的。食品和饲料中的二噁英的含量受到严格的管制和监测，并以最大限量和行动水平（MLs和ALs）为控制标准。遵循欧盟方法的任何实验室现在都可以使用GC-MS/MS进行ML符合性控制。欧盟法规对GC-MS/MS作为确证方法控制二噁英MLs的要求如下图所示。

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基于欧盟法规的要求，赛默飞英国应用团队开发了TSQ 9000 AEI二噁英分析仪，助力您食品样品的二噁英分析。TSQ 9000二噁英分析仪具有以下特点：

符合欧盟对食品和饲料样品中二噁英的所有要求，使人们对低水平的定量结果充满信心；

操作简便，即装即用。全面的Thermo Scientific™Chromeleon™色谱数据系统（CDS）软件，具有法规要求的预加载计算模板；

方法的稳健性已通过多种样品验证。

该二噁英分析仪分别由赛默飞美国应用团队、中国应用团队进行了验证。

以下所有实验，都在Thermo Scientific™ TSQ™ 9000 GC-MS/MS AEI系统上进行。配备 Trace 1310气相色谱和AS1310自动进样器。方法学实验分别在SSL和PTV进样口上重复进行。

TG-Dioxin色谱柱以其强保留性对TCDD/F异构体有着卓越的分离效果，有效避免背景中无毒的TCDD/F对2378-TCDD/F积分结果干扰。在45 min内分离了17种PCDD/Fs及其同位素标记物，HxCDF（以及HxCDD）的分离度完全满足要求。

每一种native及相应的labeled都具备2个不同的母离子和2个不同的子离子，且离子比率在整个校正范围内的偏差远远小于法规15%的要求。（另外，我们还开发了ion ratio calculator，可以计算出每种物质的SRM离子对以及理论离子比率）。

LOQ作为校正曲线最低点，其RR/RF值以及离子比率完全符合要求。

中国应用团队用TSQ 9000 AEI二噁英分析仪测试了一些能力认证样品，测试结果与GC-HRMS的测试结果一致，说明TSQ 9000 AEI二噁英分析仪可以为食品中二噁英的检测提供一种常规的确证方法。

使用CS5标准溶液检查的异构体之间的峰底重叠（点击查看大图）

筛选离子对时，应考虑母离子的强度和该母离子会生成什么样的子离子（点击查看大图）

在序列的开始和结束分别测试最小校准点;检查每种分析物的RR/RF和IR（点击查看大图）

实际样品检测结果（北京）（点击查看大图）

实际样品检测结果（UK）（点击查看大图）

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